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高压蒸气灭菌的使用方法与注意事项

高压蒸汽灭菌的使用方法与注意事项       

高压蒸汽灭菌的原理

在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。


高压蒸汽灭菌的操作方法

(1)在外层锅内加适量的水,将需要灭菌的物品放入内层锅,盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。

(2)加热使锅内产生蒸气,当压力表指针达到 33.78kPa时,打开排气阀,将冷空气排出,此时压力表指针下降,当指针下降至零时,即将排气阀关好。

(3)继续加热,锅内蒸气增加,压力表指针又上升,当锅内压力增加到所需压力时,将火力减小,按所灭菌物品的特点,使蒸气压力维持所需压力一定时间,然后将灭菌器断电或断火,让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气,然后才能开盖取物。


高压蒸汽灭菌的关键

完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法,但目的都是要排净空气,使锅内均匀升温,保证灭菌彻底。

排净锅内空气的常用方法

关闭放气阀,通电后,待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。关阀再通电后,压力表上升达到0.1MPa时,开始计时,维持压力0.1~0.15MPa 20分钟。


降压到一定程度后可缓慢放气 / 压力平衡后开盖

到达保压时间后,即可切断电源,在压力降到0.5MPa,可缓慢放出蒸气,应注意不要使压力降低太快,以致引起激烈的减压沸腾,使容器中的液体四溢。当压力降到零后,才能开盖,取出培养基,摆在平台上,以待冷凝。不可久不放气,引起培养基成分变化,以至培养基无法摆斜面。一旦放置过久,由于锅炉内有负压,盖子打不开,只要将放气阀打开,大气压入,内外压力平衡,盖子便易打开了。


关于高压蒸汽灭菌的灭菌时间和灭菌压力

对高压灭菌后不变质的物品,如无菌水、栽培介质、接种用具,可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间,既要保压彻底,又要防止培养基中的成分变质或效力降低,不能随意延长时间。


高压蒸汽灭菌的注意事项:

(1)待灭菌的物品放置不宜过紧。

(2)必须将冷空气充分排除干净,否则锅内温度达不到规定温度,影响灭菌效果

(3)灭菌完毕后,不可立即放气减压,否则瓶内液体会剧烈沸腾,冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。

(4)装培养基的试管或瓶子的棉塞上,应包油纸或牛皮纸,以防冷凝水入内。

(5)为了确保灭菌效果,应定期检查灭菌效果。

       常用的方法是将硫磺粉末(熔点为115℃)或安息香酸(熔点为120℃)置于试管内,然后进行灭菌试验。如上述物质熔化,则说明高压蒸气灭菌器内的温度已达要求,灭菌的效果是可靠的。也可将检测灭菌器效果的变色胶纸(其上有温度敏感指示剂)贴于待灭菌的物品外包装上,如胶纸上指示剂变色,亦说明灭菌效果是可靠的。

(6)现在已有微电脑自动控制的高压蒸气灭菌器,只需放去冷气后,仪器即可自动恒压定时,时间一到则自动切断电源并鸣笛,使用起来很方便。

 ( 7 ) 先灭菌再清洗原则:对于任何高压灭菌后会重复使用的污染(有潜在感染性)器材不应当事先清洗,必须在高压灭菌或消毒后再进行清洗、修复。


高压蒸汽灭菌的对象/应用

高压蒸汽灭菌是最常用的灭菌方法,一般以 101.33kPa处理15~20min,可达到对物品进行灭菌的目的。凡耐高温和潮湿的物品,如常用培养基、生理盐水、衣服、纱布、玻璃器材等都可用本法灭菌。

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